新型肺炎怎麼進行核酸檢測 爲什麼核酸檢測這麼慢
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新型肺炎的確診是通過核酸檢測來確定的,但是很多人等核酸檢測就要等好幾天才能確定,那麼爲什麼新型肺炎要通過核酸檢測才能確診呢,本站小編就來解答吧。
採樣
據瞭解,我市自試劑盒批量到位之後,火速制定了一套核酸檢測的操作流程:各醫院負責採集疑似病例的臨牀標本,由指定的標本運輸機構將標本送至具備檢測資質的機構開展實驗室病原檢測。
轉運
市疾控中心是我市具備高致病性病原微生物檢測能力的機構之一。該中心病原生物檢驗所所長熊燕介紹,從採樣、轉運、到實驗室檢測,有一系列嚴格的操作流程。
疑似病例樣本自採集後被放入專門的轉運箱,嚴格三層包裝,且內部溫度在4℃左右,運輸途中確保生物安全。
市疾控中心24小時全天收樣,在收到樣本後,第一時間由病原生物檢驗所技術人員開展檢測,實驗室完成一輪檢測需5-6小時,而全天需開展三到四輪檢測,檢驗人員連軸轉不停歇,確保從接收覈對樣本、開展檢測到報告結果全程不超過24小時。
檢測
1月30日,記者在這裏看到,標本採集後,在生物安全二級實驗室(P2實驗室)生物安全櫃內分裝,實驗室內處於負壓狀態,嚴格遵照生物安全要求。
技術人員是直接與病毒“面對面”的人,他們身穿防護服、頭戴護目鏡,按照生物安全三級實驗室的個人防護標準,全副武裝進入實驗室,在生物安全櫃內小心翼翼打開待檢樣本,提取核酸,再進行實時熒光RT-PCR檢測。
“脫下即報廢”,大家儘可能節約每一件防護服,不喝水、少吃東西,避免上廁所。長時間悶在防護服裏,出來常常是一身汗,超負荷工作狀態下必須更強化安全意識。
團隊每一位成員幾乎處於透支狀態,他們放棄與家人團聚,有的借住在附近保證及時上崗,有的吃住在辦公室,全員倒班確保樣本檢測24小時不停步。經過技術人員的努力,這裏的日檢測量迅速從200份提升至360份。
大概流程應該是:RNA提取—RTPCR(將RNA反轉錄成cDNA)—PCR擴增(2019-nCoV特異引物)—核酸電泳檢測(或者測序)。
原理大概就是把RNA提取出來,反轉錄成雙鏈的DNA,再用特異性的只能擴增新冠的引物,對樣品進行擴增(目的是爲了將信號放大數倍),然後再用核酸電泳檢測擴增產物中是否有新冠病毒。核酸電泳就是塊瓊脂糖做的凝膠(瓊脂山楂條。。。),插上電之後,不同長短的DNA跑得速度不一樣,就可以分離和檢測PCR產物。這是我以前做實驗的電泳結果照片,最右邊的條帶是Marker,指示長短的。
至於測序,我尋思三代測序技術,這個新冠的長度直接拿PCR產物測也可以了吧?我打不開NCBI,沒法看這個序列。估計太多人宅家裏上網了。實在不行,膠回收的DNA也可以測吧?應該效率還比較高。
我是做植物的,我們那個植物RNA特別難提取,我一天提25個樣品,每個樣品4個重複,也就是每天100管RNA,簡直勞模了。動物就算快點,整個RNA,再做PCR,要把那麼微量的RNA或cDNA信號放大,也要幾十個循環,怎麼也得半天。再加上儀器也有限啊,我尋思疾控中心醫院也不會每家買幾個PCR儀放着吧。。。
所謂試劑盒,也就是這過程中用的試劑你都不要一個一個自己配了,全配好的,按配方加進去就行了。但已經是很大的進步了,我之前在德國的實驗室,買不起試劑盒,整個啥都要自己配,相當於別人拿到了高等食材做的料包,你還的自己摘花椒。試劑盒也比較好用,好的酶錯配率低。
知道大家心急,但已經很好了,已經很快了。
相關部門的解答
前期樣本檢測流程,首診醫院通過規範的預檢分診,結合臨牀檢查、實驗室檢查和胸部影像檢查,經專家組會診後確認疑似病例並採樣,由轄區疾控中心將樣本轉運到市疾控中心,市疾控中心轉運到省疾控中心進行核酸檢測,每天可檢測樣本200多份。(1月16日之前我省沒有試劑盒,還需要送到國家指定的檢測機構進行病毒分離和核酸檢測),預計從採樣開始到結果返回,當前需要2天左右的時間( 1月16日之前,樣本需送到國家指定的位於北京的檢測機構,結果返回需要3~5天)。 ”
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